Fonction d’échafaudage des β-arrestines de la membrane au noyau.
Responsable du Stage :Dr Hervé Enslen, DR Inserm
tel: 01 40 51 65 54 Email : herve.enslen@inserm.fr
Institut Cochin
Résumé du Projet de Stage
Notre groupe étudie les mécanismes par lesquels l’information cellulaire se propage dans différents compartiments intracellulaires en réponse aux changements du milieu extracellulaire. Les voies de signalisation impliquées et processus cellulaires qui en découlent sont souvent dérégulés dans le cancer et nous les abordons dans des cellules normales et cancéreuses. Initialement caractérisées comme des régulateurs négatifs de la signalisation des Récepteurs-Couplés aux Protéines G (RCPG), les protéines d’échafaudages multifonctionnelles β-arrestines (βarr1 et βarr2) se lient à de nombreux partenaires de signalisation (1). Par leur capacité à organiser de façon dynamique des complexes multimoléculaires, les βarrs permettent une transmission spécifique de l’information dans l’espace et le temps et une réponse cellulaire appropriée. Des variations de leur expression et de leur localisation subcellulaire durant la progression tumorale ont été corrélée au résultat clinique (1). Nous avons démontré que les βarrs interagissent avec plusieurs protéines dont la dérégulation joue un rôle important dans la progression tumorale comme l’ubiquitine ligase Mdm2 et son substrat le suppresseur de tumeur p53, les MAP kinases ainsi que la phosphatase PTEN un autre suppresseur de tumeur (2-4). Ainsi, les βarrs régulent de façon dynamique leur localisation subcellulaire (cytoplasme, membrane plasmique, noyau), leurs activités, et les processus cellulaire associés tel que l’adhésion, la migration et la prolifération (1-2, 4-7). Plus récemment nous avons identifié un nouveau partenaire des βarrs : la tyrosine kinase FAK (Focal Adhesion Kinase), une protéine d’échafaudage dérégulée dans le cancer (8, 9). Nous avons démontré que les βarrs régulent son activité et sa localisation subcellulaire ainsi que le renouvellement des adhésions focales en aval des RCPGs (5). Les objectifs de ce projet de M2 sont d’étudier comment les propriétés d’échafaudage des βarrs peuvent être modifiées au niveau des RCPG et/ou de certains partenaires et d’en déterminer les conséquences fonctionnelles dans des cellules normales et cancéreuses. De nouveaux outils moléculaires et cellulaires ciblant les β-arrs avec de potentiels effets sur leurs fonctions ont été caractérisés au laboratoire et seront utilisés. Les approches expérimentales utilisées : immunoprécipitation, immuno-empreinte, études de proximité́ en cellules vivante (BRET), test de migration cellulaire et prolifération, mutagenèse dirigée, interférence ARN, imagerie cellulaire. Ce projet de M2 pourra être poursuivi en doctorat. Le responsable de stage est à la disposition des candidats pour discuter du projet.
References et publications récentes de l’équipe
1. Enslen H et al (2014), Handb Exp Pharmacol 219:405-425. doi:10.1007/978-3-642-41199-1_21
2. Boularan et al, (2007), Proc Natl Acad Sci U S A. 104(46):18061-6. doi: 10.1073/pnas.0705550104.
3. Paradis JS et al (2015), Proc Natl Acad Sci U S A. 112(37):E5160-8. doi: 10.1073/pnas.1508836112.
4. Lima-Fernandes E et a (2011). EMBO J 30 (13):2557-2568. doi:10.1038/emboj.2011.178. Highlights in Embo J and Science Signalling.
5. Alexander RA et al (2020), Cell Mol Life Sci. 77(24):5259-5279. doi: 10.1007/s00018-020-03471-5. Highlights F1000 (M. Schwartz 03/03/2020).
6. Scott MG et al (2002), J Biol Chem 277 (40):37693-37701. doi:10.1074/jbc.M207552200
7. Blondel-Tepaz E et al (2021). The RanBP2/SUMO- RanGAP1 complex gates β-arrestin2 nuclear entry to regulate the Mdm2-p53 signalling axis. Oncogene. 40(12):2243- 2257. doi: 10.1038/s41388-021-01704-w.
8. Corsi JM et al (2006), BMC Genomics 7:198. doi:10.1186/1471-2164-7-198
9. Corsi JM et al (2009), J Biol Chem 284 (50):34769- 34776. doi:10.1074/jbc.M109.067280. Couverture.
Equipe Signalisation des Récepteurs et Echafaudages Moléculaires
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