Equipe d’Accueil : Signalisation et Interaction Moléculaire

Intitulé de l’Unité : Unité Signalisation et Dynamique des récepteur, Département de Neuroscience, UMR CNRS 3571 Gènes, Synapses et Cognition

Nom du Responsable de l’Unité : Pierre-Jean CORRINGER

Nom du Responsable de l’Équipe : Nicolas WOLFF

Adresse :  25 rue du Docteur ROUX 75015 Paris

Responsable de l’encadrement : Nicolas WOLFF

Tél : 0604515526  Fax : ……………………… E-mail:  nicolas.wolff@pasteur.fr

Résumé du projet 

Le syndrome d’Usher est la maladie génétique la plus fréquente affectant les cellules photoréceptrices du système visuel et les cellules ciliées du système auditif. Le type 2 du syndrome d’Usher représente la première cause de cécité-surdité chez l’homme. Cette maladie rare altère un complexe protéique essentiel au développement et au bon fonctionnement des cellules ciliées de la cochlée, qui assurent la perception des sons.

Parmi les protéines impliquées, le récepteur ADGRV1, un GPCR (récepteur couplé aux protéines G), joue un rôle clé à la fois dans l’organisation des stéréocils et dans la signalisation cellulaire. ADGRV1 est une protéine transmembranaire incluant un très grand domaine extracellulaire, qui forme des liens entre les stéréocils, et un domaine GPCR intracellulaire, impliqué dans l’activité de signalisation. Entre ces deux régions se trouve un domaine appelé GAIN (GPCR autoproteolysis-inducing), responsable de l’autoclivage du récepteur durant le développement sensoriel. Bien que ce mécanisme soit essentiel, il reste largement méconnu, et son étude constitue l’objectif principal de ce stage.

Le projet proposé vise à caractériser le domaine GAIN d’ADGRV1 d’un point de vue fonctionnel et structural. Le travail portera à la fois sur le domaine GAIN isolé et sur une construction englobant la région GAIN-GPCR. Après la production et la purification des protéines recombinantes, leurs propriétés physico-chimiques (repliement, thermostabilité, oligomérisation, etc.) seront analysées. En parallèle, nous initierons la cristallisation pour résoudre la structure atomique du domaine GAIN par diffraction au rayons X, ainsi que la préparation de grilles de cryo-microscopie électronique afin d’obtenir la structure GAIN-GPCR avec une résolution maximale. Des expériences fonctionnelles seront également conduites (tests de liaison à des partenaires, activité de signalisation, localisation cellulaire), combinant des approches de biologie cellulaire, biochimie et biophysique. L’équipe d’accueil possède une expertise reconnue dans ces domaines et un accès autonome aux plateformes technologiques de l’Institut Pasteur, notamment à la plateforme de cryo-microscopie électronique (Glacios 200 keV et Titan Krios 300 keV).

 

Dernières Publications en lien avec le projet : 

  • Colcombet-Cazenave, B., Monéron, G., El Helou, A., DiGregorio, D., Michel, V., Wolff, N., (2025) Super-resolution mapping of the ankle link proteins ADGRV1 and PDZD7 in developing auditory hair cells, iScience, in press.
  • Colcombet-Cazenave B, Cordier F, Zhu Y, Bouvier G, Litsardaki E, Laserre L, Prevost MS, Raynal B, Caillet-Saguy C, Wolff N. (2022) Deciphering the Molecular Interaction Between the Adhesion G Protein-Coupled Receptor ADGRV1 and its PDZ-Containing Regulator PDZD7. Front Mol Biosci. Jun 9:923740.
  • Colcombet-Cazenave, B., Druart, K., Bonnet, C., Petit, C., Spérandio, O., Guglielmini, J., Wolff N. (2021) Phylogenetic analysis of Harmonin Homology Domains. BMC Bioinformatics, 22(1):190.
    • Zhu Y, Delhommel F, Cordier F, Lüchow S, Mechaly A, Colcombet-Cazenave B, Girault V, Pepermans E, Bahloul A, Gautier C, Brûlé S, Raynal B, Hoos S, Haouz A, Caillet-Saguy C, Ivarsson Y,Wolff N. (2020) Deciphering the Unexpected Binding Capacity of the Third PDZ Domain of Whirlin to Various Cochlear Hair Cell Partners. J Mol Biol. 432(22):5920-5937.
    • Gautier C, Troilo F, Cordier F, Malagrinò F, Toto A, Visconti L, Zhu Y, Brunori M, Wolff N and Gianni S (2020) Hidden kinetic traps in multidomain folding highlight the presence of a misfolded, but functionally competent, intermediate, Proc Natl Acad Sci U S A, 117(33):19963-19969.

  Ce projet s’inscrit dans la perspective d’une thèse

Type de financement prévu : Concours école doctorale

 Ecole Doctorale de rattachement :  ED 515 Complexité du Vivant